超凈工作臺監控規程及使用指南
超凈工作臺是微生物檢測實驗室使用很廣泛的設備,應建立監控規程與使用指南。
1、超凈工作臺監控規程:超凈工作臺在管理上應制定相應的監控規程,其主要內容是:①定期監測超凈工作臺、無菌隔離系統的內表面的微生物學質量及其內部的空氣質量(粒子和微生物)要求所用的高效過濾器應能確保使大于等于0.3um的粒子的截留率達到99.97%以上。層流空氣的流速應足以將工作區的粒子帶出去。一般說來,在距離過濾器下游15—30cm處的平面上(工作區),理想的層流速度應控制在0.36—0.54m/s之間;
②高效過濾器的完好性和層流速率應經過確認,在安裝完備后須在使用現場進行完好性(泄漏)檢查和過濾效率(性能)測試。以后還須定期進行此類測試(通常每半年至少檢查1次);
③日常管理一旦發現設備運行不穩,或環境監控結果異常,或微生物檢驗結果偏差呈上升趨勢,均須立即進行完好性檢查和性能測試。此類檢查非常重要,這樣可以有效避免給無菌操作帶來的潛在污染風險。無菌作業時,應同時監控操作區空氣以及操作臺表面的微生物學質量,在實驗時,應同時做陰陽性對照試驗。
2、超凈工作臺使用指南:層流凈化工作臺使用指南的主要內容有:應在人員走動相對較少,并且是在離門較遠的位置安置層流凈化工作臺,目的是使設備周圍環境的氣流相對穩定,不影響操作區,更不得對操作區層流產生干擾。
設備開啟后,操作人員應首先檢查壓差指示表的讀數是否正常,與常規壓差相比,壓差偏小或偏大均表明設備運行異常,需立即調查并采取必要的糾偏措施。
如果操作區內安裝有紫外燈,操作前必須關閉紫外燈直至完成所有的無菌作業。防止紫外線對操作人員的損害及對樣品中可能存在的微生物的損傷。
操作人員戴無菌乳膠手套和無菌袖套后方可在層流區操作。開啟工作臺后,應采用無菌消毒劑(70%無菌乙醇)對其表面消毒,至少等待5min后,方可開始操作。無菌操作前,置于工作臺內的所有物品均應經過充分消毒并直至風干。工作區內的所有物品均應排放整齊,以免干擾氣流方向。應即時將超凈工作臺,內的閑置物品撤離出去,并且不得堵住氣流的進口。
操作人員應當熟悉層流凈化工作臺的設計、工作原理及其氣流模式。
普通層流凈化工作臺內的氣流最終直接對著操作者而排向周圍環境。因此,此類凈化工作臺不得用于處理感染性物品、有毒物品或敏感物品等。它們只適用一般性的無菌操作活動,如無菌物品的裝配、常規物品的微生物檢查、培養基的制備等。盡管從表面上看,垂直層流凈化工作臺的工作區氣流未經任何人員及周圍環境,勢必給操作人員及周圍環境造成潛在性污染;操作要避免對周圍環境和操作人員產生污染。使用層流工作臺時,務必要確保高效過濾器未被堵塞,從而保證潔凈空氣吹向并覆蓋整個工作區。為防止擾亂層流,操作人員應盡可能避免將手和手臂在層流區移進或移出,即便移動,也應小心謹慎,所有活動盡可能地在無菌物品暴露區的下游(順著層流方向)進行。實驗室配備一臺凈化工作臺最好是生物安全柜,專用于常規性微生物菌種的處理,如微生物的鑒別、生物指示劑的制備與培養、陽性對照或培養基靈敏度檢查用標準菌株的制備、保藏和使用等。
在潔凈區內,如條件許可,盡量使層流凈化工作臺始終處于運行狀態。但是,一旦停止運行而重新啟動后,要對工作區進行徹底性消毒并且在使用前至少要預運行5min。此外,在每次使用前和使用后,均應對工作臺面采取清潔和消毒措施。
要對室內各類層流工作臺的運行、清潔和消毒、校驗和維修等制定詳細的標準操作規程。為每臺層流工作臺、HTY無菌隔離系統配備使用和維修記錄。使用記錄的內容包括:使用日期及時間、儀器使用前后的狀態、清潔或消毒狀態及使用人的簽名等;維修記錄內容包括:故障說明、維修情況及維修人員和設備責任人的簽名等。定期對設備的清潔或消毒記錄和環境監控記錄進行回顧性審查,以評估層流臺內工作區的維護狀況。
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